技術(shù)文章
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細(xì)胞培養(yǎng)有兩種基本方式,一種是人工基質(zhì)上的單層細(xì)胞(貼壁培養(yǎng)),另一種是在培養(yǎng)基中自由漂?。☉腋∨囵B(yǎng))。那么你知道貼壁細(xì)胞培養(yǎng)和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、貼壁培養(yǎng)貼壁培養(yǎng)是指細(xì)胞貼附在一定的固相表面進(jìn)行的培養(yǎng)。貼壁依賴型細(xì)胞在培養(yǎng)時要貼附于培養(yǎng)(瓶)器皿壁上,細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展,然后開始有絲分裂,并很快進(jìn)入對數(shù)生長期。一般數(shù)天后就鋪滿培養(yǎng)表面,并形成致密的細(xì)胞單層。二、懸浮培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動或搖動的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)...
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你知道細(xì)胞表面染色實(shí)驗操作流程是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、細(xì)胞計數(shù)將培養(yǎng)好的細(xì)胞收集于15mL離心管并計數(shù);500g離心4min,去上清。二、制備單細(xì)胞懸液將收集的細(xì)胞用1mL0.5%BSA/PBS溶液重懸,400g離心3min,去上清,重復(fù)2次;用0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞至濃度1x106個細(xì)胞/mL,分配到96孔板中,每孔100μl細(xì)胞懸液。三、阻斷Fc受體室溫孵育10-20min。四、一抗孵育每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl,2-8℃反應(yīng)30min。五、...
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免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)是一種使用熒光抗體或染料來檢測細(xì)胞內(nèi)靶抗原的技術(shù)。那么免疫細(xì)胞(ICC)實(shí)驗常見問題有哪些?讓我們一起來看看吧!一、熒光信號弱1.樣品質(zhì)量選用新鮮制備的樣本以及適當(dāng)?shù)谋3謼l件。2.靶標(biāo)豐度低適當(dāng)提高一抗?jié)舛取_x擇熒光強(qiáng)度更強(qiáng)的二抗。3.固定方法不當(dāng)甲醛和蛋白的氨基通過共價鍵結(jié)合,可能會遮蓋抗原表位,導(dǎo)致靶表位信號減弱。建議調(diào)整抗原修復(fù)方法或固定方法。多聚甲醛會與GFP熒光蛋白發(fā)生醛化反應(yīng),導(dǎo)致信號減弱。檢測膜蛋白一般不建議使用甲醇或丙酮固定,有機(jī)溶劑能夠...
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊?xì)胞內(nèi)的技術(shù)。那你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類方法是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在的時間長短,可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染瞬時轉(zhuǎn)染:指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動物細(xì)胞內(nèi),該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。細(xì)胞中瞬時轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時間有限,通常僅持續(xù)幾天,直到外源基因在細(xì)胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時轉(zhuǎn)染不...
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Gibco是賽默飛世爾科技的品牌組合中的重要一員。自1962年品牌創(chuàng)立以來,Gibco對高品質(zhì)的追求始終如一,堅持一以貫之的高標(biāo)準(zhǔn),以wu與倫比的創(chuàng)新、可靠性和可追溯性為科研和生物藥物的生產(chǎn)提供了堅實(shí)的質(zhì)量保障,一直是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用科學(xué)的先驅(qū)。作為市場的領(lǐng)dao者,Gibco是科研、生物技術(shù)和制藥研究專業(yè)人士gong認(rèn)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。此外,憑借廣泛的創(chuàng)新與可靠的產(chǎn)品、服務(wù)、專業(yè)知識和支持,Gibco也在科學(xué)家與他們所需的各種資源之間,建立起緊密的連接,推動他們實(shí)現(xiàn)*研究和*生...
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